基于CRISPR-Cas9定向编辑CCL17和CCL22基因的研究

• 作者: 吴凤麟 沈晗 瞿创 高淑慧
• 来源期刊: 中国当代医药
• 学科: 医学
• 关键词: CRISPR 引导RNA 趋化因子 基因编辑
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: R319
• 字数: 3188字
• 语种: 中文

摘要

目的 针对人源的CCL17和CCL22基因进行CRISPR/Cas9-gRNA设计,并验证设计的sgRNA的有效敲除效率.方法 利用CRISPR网站提供的工具对CCL17和CCL22基因的靶向编辑位点进行筛选设计,然后构建CRISPR-Cas9-CCL17和CRISPR-Cas9-CCL22敲除质粒,并将构建好的质粒转入293 T细胞系,然后通过基因组PCR产物的T-A克隆测序方法分别验证设计的sgRNA敲除质粒的编辑效率.结果 成功构建针对于人源CCL17和CCL22基因的sgRNA敲除质粒,并有着良好的编辑效率,均达70％以上.结论 针对CCL17和CCL22基因设计的CRISPR敲除质粒对靶基因有着很好的编辑效果,为后续基于CCL17和CCL22的相关性研究奠定了基础.