过表达miR-455促进肝癌细胞诱导的管型形成

• 作者: 伊丽娜 孙鹏 张烜 李文希 赵方新 魏欢
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: miR-455 真核表达载体 肝癌细胞 微管形成
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1248-1252,1258
• 页数: 6页
• 分类号: R-33|Q78|R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2018.07.010

摘要

目的:构建miR-455前体的真核表达载体,探讨其对肝癌细胞诱导管型形成的影响.方法:采用PCR扩增miR-455前体序列,通过双酶切将其连接到真核表达载体pcDNA3中.连接产物转化入大肠杆菌内进行扩增,采用菌落PCR、双酶切和测序鉴定重组子.将构建的质粒转染SMMC-7721细胞,通过real-time PCR检测成熟miR-455的表达,采用ELISA方法检测培养液上清中VEGF的表达.用该上清处理人脐静脉内皮细胞HUVEC后,检测管型形成的情况.结果:本实验成功构建了miR-455前体的真核表达载体,将其瞬时转染SMMC-7721细胞后,real-time PCR检测结果显示miR-455表达水平显著升高(P＜0.01).过表达miR-455后,SMMC-7721细胞上清VEGF表达水平呈时间依赖性升高(24 h P＜0.05,48 h和72 h P＜0.01).人脐静脉内皮细胞分别用转染pcDNA3和pcDNA3-pre-455的肝癌细胞培养液上清(72 h)重悬,接种于基质胶Matrigel上,转染pcDNA3-pre-455组形成典型的微管,管样结构明显完整.结论:过表达miR-455可促进肝癌细胞诱导的微管形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙鹏	内蒙古医科大学基础医学院	29	90	5.0	8.0
2	伊丽娜	内蒙古医科大学药学院	7	6	2.0	2.0
3	赵方新	内蒙古医科大学基础医学院	6	18	3.0	4.0
4	张烜	内蒙古医科大学基础医学院	10	14	2.0	3.0
5	李文希	内蒙古医科大学药学院	3	0	0.0	0.0
6	魏欢	内蒙古医科大学基础医学院	1	0	0.0	0.0