摘要:
目的 对分离的甘草内生菌进行鉴定,并研究其抗炎作用.方法 取对数生长期贴壁巨噬细胞RAW264.7,制成1×106cell·mL-1的单细胞悬液,培养至细胞贴壁.空白组,加1640培养基培养;模型组,加1 mg·L-1脂多糖(LPS)培养;对照组,分别加入10,20,40 mg·L-1的甘草水提液浸膏;实验组,分别加入10,20,40 mg·L-1的内生菌发酵物(JTYB006、JTYB012、JTYB029、JTYF023),药物组均预处理2h,再加入1 mg·mL-1 LPS刺激培养;以Griess法检测一氧化氮(N0)含量,以酶联免疫吸附法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素-E2(PGE2)含量.按照体重将昆明种小鼠随机分为7组:模型组、对照Ⅰ组、对照Ⅱ组、实验Ⅰ~Ⅳ组.通过二甲苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高,评价甘草内生菌发酵物的体内抗炎作用.结果 甘草内生细菌JTYB006、JTYB012、JTYB029分别属于芽孢杆菌(Bacillus.)3个不同种属,内生真菌JTYF023属于曲霉属赭曲霉.模型组的NO、PGE2、IL-1β的含量分别为(89.53±8.02) μμmol·L-1,(420.85±57.85) pg·mL-1,(35.24±5.77)pg·mL-1,40 mg·L-1实验Ⅰ~Ⅳ组(JTYB006、JTYB012、JTYB029、JTYF023)的NO含量分别为(65.60±4.31),(63.48±6.89),(62.30±5.92),(56.47±7.26) μmol·L-1,PGE2含量为(254.07±43.62),(295.40±49.13),(280.65±52.91),(296.42±54.90) pg·mL-1,IL-1β的含量为(21.34±5.36),(20.65 ±4.78),(16.67±3.98),(22.54±5.30)pg· mL-1,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P <0.05或P<0.01).模型组小鼠耳肿胀度、腹腔冲洗液光密度值分别为17.99±1.60,0.28±0.02;实验Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ组的小鼠耳肿胀度分别为15.05±2.38,13.68±2.69,15.36±2.03,腹腔冲洗液光密度值分别为0.24±0.04,0.18±0.05,0.21±0.05,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P <0.05或P<0.01).结论 3株(JTYB006、JTYB029、JTYF023)甘草内生菌发酵物具有体外及体内抗炎作用.