石蒜碱诱导人肝癌HepG2细胞自噬的体外实验研究

• 作者: 季宇彬 朱洪剑 汝鑫 王树巍 赵贺 辛国松 魏驰
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 石蒜碱 抗肿瘤 肝癌HepG2细胞 细胞自噬 自噬小体
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 1449-1453
• 页数: 5页
• 分类号: R285.5
• 字数: 3869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2018.06.041

摘要

目的:探讨石蒜碱诱导人肝癌HepG2细胞自噬的作用,为石蒜碱抗肿瘤研究提供实验依据.方法:体外培养人肝癌HepG2细胞,采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率.倒置显微镜观察细胞形态,荧光显微镜观察细胞自噬小体.流式细胞术测定细胞自噬率及加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用后的细胞自噬率变化.Westernblot法检测与自噬相关的蛋白LC3-Ⅱ与Beclin-1的表达.结果:石蒜碱对HepG2细胞增殖抑制作用随浓度的升高而增强,其作用72 h的IC50为6.27 μmol/L.倒置显微镜观察阴性对照组细胞形状完好且紧密排列.石蒜碱各组随给药浓度的升高,细胞变圆、漂浮、排列稀疏生长缓慢的状态越加明显;荧光显微镜可观察到细胞自噬小体的数量随石蒜碱浓度升高而升高.流式细胞仪检测石蒜碱组细胞自噬率与给药浓度呈正相关,加入抑制剂(3-MA)后细胞自噬受到抑制.Western blot法检测结果显示随石蒜碱浓度的升高LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达上调,均显著高于对照组(P＜0.01);3-MA抑制剂能显著拮抗其作用.结论:石蒜碱能诱导肝癌HepG2细胞自噬,其机制可能是上调肝癌HepG2细胞中LC3-Ⅱ与Beclin-1蛋白的表达,促使自噬小体形成与成熟,导致细胞过度自噬,最终使细胞凋亡.