炎症诱导缺血缺氧环境下骨髓间充质干细胞的活性

• 作者: 刘荣华 周朦静 官紫祎 张妮 方聪 李雪亮 罗颖颖 陈兰英
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 缺血缺氧 炎症环境 肿瘤坏死因子α 腊多糖 细胞活性 干细胞 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2018,（33）
• 所属期刊栏目: 骨髓干细胞
• 页码范围: 5259-5267
• 页数: 9页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.0659

摘要

背景:局部组织缺血缺氧和炎症微环境因素是造成骨髓间充质干细胞生存率低的主要原因.目的:探讨炎症环境下缺血缺氧对骨髓间充质干细胞活性的影响以及细胞活性与炎症因子之间的关系.方法:采用全骨髓培养法提取培养骨髓间充质干细胞,流式细胞仪对细胞进行鉴定,将第3代细胞进行不同时间氧糖剥夺(6,12,24 h)和炎症诱导(氧糖剥夺、氧糖剥夺+20 μg/L肿瘤坏死因子α、氧糖剥夺+100 μg/L脂多糖),倒置显微镜观察细胞生长状况,MTT法和流式细胞仪测定细胞活力,ELISA检测上清液中白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α水平,RT-PCR检测细胞中白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、NF-KB基因表达水平.结果与结论:①成功分离培养大鼠骨髓间充质干细胞且纯度为95％以上;②氧糖剥夺6h和12h细胞活力明显增强,氧糖剥夺24 h细胞活力明显下降;在肿瘤坏死因子α和脂多糖诱导下氧糖剥夺6,12,24 h后细胞活力下降;③与正常条件比较,氧糖剥夺6,12h后白细胞介素6、白细胞介素10水平和白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、NF-KB基因表达下降;④与氧糖剥夺条件比较,在肿瘤坏死因子α和脂多糖诱导下氧糖剥夺6,12h后白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平和白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、NF-KB基因表达显著升高;⑤由此可见,在肿瘤坏死因子α和脂多糖诱导下,骨髓间充质干细胞活力受炎症因子表达和分泌影响,随着炎症因子表达和分泌增加,骨髓间充质干细胞的活力降低.