维药毛菊苣及其易混品菊苣的位点特异性PCR鉴别研究

• 作者: 何江 地力努尔·吐尔逊江 杨伟俊 程波 郭文倩
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 毛菊苣 rbcL基因 位点特异性PCR 分子鉴定 总DNA
• 年，卷（期）: 2018,（18）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 4393-4398
• 页数: 6页
• 分类号: R286.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.18.026

摘要

目的 建立维吾尔药毛菊苣及其易混品菊苣的位点特异性PCR鉴别方法.方法 采集不同地理区域的毛菊苣及其易混品,提取样品基因组总DNA.通过对其叶绿体rbcL基因片段进行扩增、测序,进行多重序列比对后根据其变异位点设计位点特异性鉴别引物,对其反应条件进行优化,确定检出限,建立位点特异性PCR鉴别方法.结果 建立的位点特异性PCR鉴别体系优化结果为30 μL反应体系包含Taq酶0.25 U、10×buffer 2.5 μL、dNTP 2.0 μL、正、反向引物各0.5 μL、总DNA 2 μL、ddH2O 22.25μL.适宜的扩增条件为94℃预变性3 min;94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1min,32个循坏;最后72℃延伸7min.对20份毛菊苣与菊苣药材进行扩增,其中毛菊苣能够扩增出约230 bp目的片段条带,而菊苣样品则不能扩增出明显的目的条带.结论 建立并优化了毛菊苣及其易混品菊苣位点特异性PCR鉴别技术,能够准确而可靠的达到2种药材的有效鉴别.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨伟俊	新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室	41	203	8.0	11.0
2	何江	新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室	31	125	7.0	9.0
3	程波	新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室	5	14	3.0	3.0
4	地力努尔·吐尔逊江	新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室	6	32	3.0	5.0
5	郭文倩	新疆医科大学药学院	1	1	1.0	1.0