艰难梭菌毒素B适配子的筛选和鉴定

• 作者: 刘红菊 吴爱武 苏恒
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 艰难梭菌毒素B SELEX 适配子 亲和常数
• 年，卷（期）: 2018,（20）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 2465-2470,2474
• 页数: 7页
• 分类号: R446.5|R378
• 字数: 6055字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2018.20.001

摘要

目的 筛选和鉴定艰难梭菌毒素B适配子(Apt).方法 体外合成80 bp的单链DNA(ssDNA)随机文库,重组表达艰难梭菌毒素B蛋白,利用指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选艰难梭菌毒素B的核酸适配子.使用DNA MAN5.2.2.0软件和mfold软件筛选出的适配子序列进行同源性和二级结构的分析,并利用非竞争酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定其亲和常数.结果 经过12轮筛选,文库中随机ssDNA与艰难梭菌毒素B的结合率从0.8％ 增加到39.6％,筛选出51条适配子,二级结构最稳定的是Apt-B20,其亲和常数为3.76×10-7.结论 利用SELEX技术成功筛选出高亲和力的Apt,为临床上艰难梭菌感染的实验室快速诊断提供一定的参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴爱武	广州医科大学金域检验学院	35	87	6.0	6.0
2	刘红菊	广州医科大学金域检验学院	3	2	1.0	1.0
3	苏恒	广州医科大学金域检验学院	6	9	2.0	3.0