重组角质细胞生长因子(KGF)的原核表达及优化

• 作者: 田顺立 郑春阳
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 角质细胞生长因子(KGF) 原核表达系统 密码子优化 融合表达 标签蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（33）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 71-74
• 页数: 4页
• 分类号: Q813|Q816
• 字数: 2758字
• 语种: 中文

摘要

[目的]在原核表达系统中进行重组人角质细胞生长因子(KGF)的表达及优化.[方法]选取缺失N端23个氨基酸残基的KGF片段作为目的基因,按照大肠杆菌的密码子偏好性,将其进行密码子优化.使用BL21(DE3)菌株表达KGF(ΔN23)、SUMO融合的SUMO-KGF(ΔN23)和Fh8-SUMO融合的Fh8-SUMO-KGF(ΔN23),并测试不同表达温度(37、23℃)对KGF(ΔN23)表达结果的影响.[结果]在BL21(DE3)菌株中,37℃表达时KGF(ΔN23),SUMO-KGF(ΔN23)和Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)的表达量都较高,其中可溶性蛋白表达量KGF(ΔN23)<SUMO-KGF(ΔN23)<Fh8-SUMO-KGF(ΔN23).降低诱导温度为23℃后,3种KGF的表达量都显著降低,但是可溶性蛋白的占比显著提高,均接近100％.[结论]降低诱导温度能够促进KGF的可溶性表达,但是总蛋白的表达水平显著下降;与可溶性标签蛋白融合表达能够提高KGF在37℃表达时可溶性蛋白占比,其中融合Fh8-SUMO标签的KGF表达量和可溶性蛋白占比较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑春阳	华北理工大学基础医学院	7	14	2.0	3.0
3	田顺立	天津医科大学总医院保健医疗部	3	1	1.0	1.0