刺参2种天冬氨酸蛋白酶的酶学性质及其对自溶的影响

• 作者: 侯红漫 孙黎明 季晓彤 崔钰婷 年益莹 张公亮 王玲 薛鹏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 刺参 天冬氨酸蛋白酶 组织蛋白酶D 组织蛋白酶E 酶学性质 自溶
• 年，卷（期）: 2018,（14）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 99-105
• 页数: 7页
• 分类号: TS254.4
• 字数: 6486字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201814015

摘要

对刺参体内2种天冬氨酸蛋白酶——组织蛋白酶D(cathepsinD,CatD)和组织蛋白酶E(Cat E)的酶学性质进行探讨,并考察两者可能在刺参自溶中的参与作用.先用Tris-HCl缓冲溶液提取刺参体壁中的粗酶,采用特异性荧光底物法测定Cat D和Cat E的酶学性质.结果表明,Cat D和Cat E的最适pH值分别为5.0和4.0,分别在60℃和40℃呈现最大酶活性,两者在20～40℃活性均较为稳定.Zn2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Mn2+可抑制Cat D的活性,抑制率分别为86％、76.3％、29.2％、56.5％和48.5％.Fe3+、Fe2+、Cu2+可抑制CatE的活力,抑制率分别为99.1％、82.2％和28.6％.Pepstatin A、Z-Leu-Leu-Leu-H、苯甲基磺酸氟、1,10-菲啰啉能够抑制两者活性,抑制率分别约为98％～99％、65％～78％、30％～35％、19％～23％.二硫苏糖醇、L-Cys和乙二胺四乙酸则可将两者活性分别提升30.4％～31.1％、7.58％～9.64％、6.6％～7.9％.结果表明,刺参Cat D和Cat E为2种具有一定金属离子敏感性和依赖性的天冬氨酸蛋白酶,其活性中心有丝氨酸和半胱氨酸参与其活性调节,且两者很有可能参与刺参自溶过程中蛋白质的降解.