2,3-丁二醇脱氢酶基因(BudC)过表达菌株的构建和初步鉴定

• 作者: 孙雯 宋刚 王长丽 葛菁萍
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 2,3-丁二醇 产酸克雷伯氏菌 2,3-丁二醇脱氢酶 荧光定量PCR 电转化法
• 年，卷（期）: 2018,（27）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 89-96
• 页数: 8页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

旨在过表达BudC进而上调2,3-丁二醇(2,3-Butanediol,2,3-BD)的合成,通过基因工程手段构建整合载体pR1SW-BudC,经PCR和酶切双重验证后将其电转化至产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HD79.结果经卡那霉素筛选,获得一株菌株K.oxytoca HD79-01.以原始菌株为对照,摇瓶发酵检测2,3-BD含量和相关酶活,qRT-PCR检测BudC表达差异,最终BudC在HD79-01中转录水平的表达量为HD79的45.25倍(P＜0.01).摇瓶发酵显示2,3-BD的最高产量、转化率和生产强度分别提高了24.54％、10.97％、45.08％[分别为30.818士o.o03g几、0.253士0.013g/g、0.43士0.01g/(L·h)],酶活提高了3.61倍(0.563士0.003 U/mg).因此,2,3-丁二醇脱氢酶基因(BudC)过表达菌株构建不仅成功的提高了2,3-BD的产量也为实现2,3-BD的工业化生产奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛菁萍	黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室	86	718	16.0	23.0
2	宋刚	黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室	28	109	5.0	9.0
3	王长丽	黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室	7	9	1.0	3.0
4	孙雯	黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室	2	0	0.0	0.0