布渣叶黄烷酮-2-羟化酶基因cDNA克隆及其生物信息学和表达分析

• 作者: 张初梅 李坤平 林爽 潘天玲 袁旭江
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 布渣叶 黄烷酮-2-羟化酶 黄酮碳苷 类黄酮生物合成 基因克隆 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 188-193
• 页数: 6页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.01.026

摘要

目的 从布渣叶中克隆黄酮碳苷合成途径关键酶黄烷酮-2-羟化酶(flavanone 2-hydroxylase,F2H)基因,构建原核表达载体,对其进行生物信息学和表达模式分析.方法 根据布渣叶转录组数据中注释为F2H的Unigene设计特异性引物,利用PCR法扩增MpF2H基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析.同时,依据F2H序列,设计特异引物,采用RT-qPCR方法对其在芽、叶、枝、花、果等组织中的表达进行测定.结果 MpF2H基因ORF全长为1 557 bp(Genbank登录号KY652921),编码518个氨基酸;相对分子质量54 500,理论等电点5.49,含有信号肽,不含跨膜域,可能定位于叶绿体.同时,MpF2H基因在不同组织中均有表达,其中在叶中表达量最高,在枝和花中表达量最低.结论 MpF2H基因在不同组织中表达量差异较大.克隆了MpF2H基因cDNA,构建了其原核表达载体pET30a-MpF2H,为MpF2H基因的原核表达和功能验证奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林爽	广东药科大学中药学院	7	19	3.0	4.0
2	李坤平	广东药科大学药学院	18	27	3.0	5.0
3	袁旭江	广东药科大学中药开发研究所	4	1	1.0	1.0
4	张初梅	广东药科大学药学院	5	1	1.0	1.0
5	潘天玲	广东药科大学药学院	4	1	1.0	1.0