钙调神经磷酸酶Aβ基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流和动作电位的变化

• 作者: 何炯红 夏桂玲 扶泽南 杨龙 田野 黄勇淇
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 钙调神经磷酸酶 心肌动作电位 内向整流钾电流 心室肥大
• 年，卷（期）: 2018,（43）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: R541.7
• 字数: 3303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2018.43.008

摘要

目的 观察钙调神经磷酸酶Aβ亚基(CnAβ)基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流(Ik1)和动作电位的变化.方法 1天龄SD乳鼠,分离心室肌细胞,培养48h后换为无血清培养基,将细胞分为A、B、C、D组.A组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染6 h时更换成2倍体积新鲜无血清DMEM,培养48 h.B组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染6 h换为2倍体积新鲜无血清DMEM,感染24 h时加入终浓度为100μmol/L的PE,培养48 h.C组加入MOI=50的A1,感染6 h时换成2倍体积新鲜无血清DMEM,感染24 h时加入终浓度为100μmol/L的PE,培养48 h.D组加入MOI=50的重组腺病毒shRNA干扰载体介导沉默编码CnAβ的基因(Ad-CnAβshRNA1,A1),感染6 h时换成2倍体积新鲜无血清DMEM,培养48 h.采用Western blotting法检测各组心室肌细胞CnAβ蛋白,采用全细胞膜片钳实验检测Ik1,观察并记录动作电位复极20％、50％和90％(APD20、APD50、APD90)时的动作电位.结果 A、B、C、D组心室肌细胞CnAβ蛋白相对表达量分别为1.0±0.01、2.59±0.30、1.00±0.16、0.82±0.16;B组与A组比较,P<0.05;C组与B组比较,P<0.05.与A组比较,B组-140 mV～-90 mV时心室肌细胞Ik1电流密度降低(P均<0.05);与B组比较,C组心室肌细胞Ik1电流密度升高(P均<0.05).与A组比较,B组心室肌细胞APD20、APD50、APD90均延长(P均<0.05);与B组比较,C组B组心室肌细胞APD20、APD50、APD90均缩短(P均<0.05).结论 CnAβ基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞Ik1电流密度升高,心室肌细胞APD20、APD50、APD90均降低.CnAβ可能通过调节Ik1电流密度减小、APD延长参与心室肥大的发生发展.