长链非编码RNA生长阻滞特异转录物5/微小RNA200c-3p/血管紧张素转换酶2信号轴参与呼吸窘迫综合征人肺上皮细胞A549的凋亡

• 作者: 孙荣青 李宏宾 石慧娟 訾盼盼 高敏
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 呼吸窘迫综合征 生长阻滞特异转录物5 微小RNA-200c-3p 血管紧张素转换酶2 人肺上皮细胞A549
• 年，卷（期）: 2018,（41）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3354-3359
• 页数: 6页
• 字数: 5239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2018.41.013

摘要

目的 探究长链非编码RNA生长阻滞特异转录物5/微小RNA 200c-3p/血管紧张素转换酶2(lncRNA GAS5/miR-200c-3 p/ACE2)信号轴是否参与呼吸窘迫综合征(ARDS)肺上皮细胞的凋亡.方法 构建ARDS大鼠模型,实验分为对照组(Control组)、LPS处理组(ARDS组)、LPS+pcDNA处理组(ARDS+ pcDNA组)和LPS+ pcDNA-GAS5处理组(ARDS+ pcDNA-GAS5组).ARDS大鼠构建6h后收集4组大鼠动脉血及肺组织,血气分析仪进行测定氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2),并观察GAS5的表达变化.随后,用LPS处理人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分为未处理、LPS、LPS+ pcDNA、LPS+ pcDNA-GAS5、LPS+ pcDNA-GAS5+ pre-NC和LPS+ pcDNA-GAS5+ miR-200c-3pmimic组.实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNA GAS5、ACE2和miR-200c-3p的表达水平;RNA免疫沉淀和RNA下拉(pull-down)实验用于检测GAS5与miR-200c-3p的结合与调控;Western blotting法检测ACE2的蛋白表达;流式细胞术用于检测A549细胞的凋亡.组间数据比较采用t检验.结果 ARDS大鼠实验表明与ARDS+ pcDNA组相比,ARDS+ pcDNA-GAS5组PO2值显著升高[(81.5±3.3)比(57.5±5.1)mmHg,f=4.850,P＜0.05],PCO2值显著降低[(50.6±1.9)比(64.0±1.9) mmHg,t=5.940,P＜0.05].细胞实验中,与Control组相比,LPS组A549细胞中lncRNAGAS5的表达显著下降(0.43±0.01比1.01±0.01,t=0.242,P＜0.05).与LPS+ pcDNA组相比,LPS+ pcDNA-GAS5组ACE2的表达水平显著升高(0.85±0.04比0.34±0.02,t=1.800,P＜0.05);与LPS+ pcDNA-GAS5+ pre-NC组相比,LPS+ pcDNA-GAS5+ miR-200c-3p mimic组ACE2的表达水平显著降低(0.62±0.01比0.84±0.02,t=9.440,P＜0.05).与未处理组相比,LPS组A549细胞凋亡百分比明显升高(25.90±0.61比7.90±0.22,t=0.257,P＜0.05);与LPS+ pcDNA组相比,LPS+pcDNA-GAS5组凋亡百分比明显降低(10.50±0.37比26.37±0.45,t=1.760,P＜0.05);与LPS+pcDNA-GAS5+ pre-NC组相比,LPS+ pcDNA-GAS5+ miR-200c-3p mimic组细胞凋亡百分比显著升高(19.07±0.56比10.87±0.26,=0.643,P＜0.05).结论 ARDS模型中,lncRNA GAS5下调促进miR-200c-3p表达,使ACE2表达下降,从而使肺上皮细胞凋亡增加,促进ARDS进展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙荣青	郑州大学第一附属医院重症医学科	49	252	10.0	14.0
2	高敏	郑州大学第一附属医院重症医学科	51	315	11.0	15.0
3	石慧娟	郑州大学第一附属医院重症医学科	2	3	1.0	1.0
4	訾盼盼	郑州大学第一附属医院重症医学科	2	8	2.0	2.0
5	李宏宾	郑州大学第一附属医院重症医学科	4	5	2.0	2.0