mok E基因过表达对红曲霉Monacolin K产量、菌丝及孢子形态的影响

• 作者: 任志远 李贞景 林琳 武淑芬 王昌禄 陈勉华
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 红曲霉 基因过表达 Monacolin K 逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应 扫描电镜 孢子
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 45-49
• 页数: 5页
• 分类号: TQ920.1
• 字数: 3260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201808008

摘要

红曲霉中mok E基因是红曲霉次级代谢产物Monacolin K生物合成的一个相关基因,mok E基因表达量与Monacolin K产量呈正相关.以mok E基因为目的基因,构建红曲霉mok E基因过表达工程菌株,通过逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)确定mok E基因过表达转化子,对转化子Monacolin K产量进行测定,同时利用扫描电镜,对野生型红曲霉M1及转化子菌丝、孢子进行观察.结果表明:以潮霉素抗性基因为筛选标记,成功得到240个转化子,对其中9个转化子进行mok E基因表达量测定,有3 株转化子mok E基因表达量增加,分别为T2、T8、T9转化子,确定其为mok E基因过表达转化子;T2、T8、T9转化子内酯型Monacolin K产量分别为2159.7、4177.6、3365.7 μg/g,与野生型红曲霉Monacolin K产量(1447.8 μg/g)相比,分别提高了49.2%、188.5%及132.5%.扫描电镜结果显示,mok E基因过表达,对红曲霉的菌丝体、孢子形态及生殖方式均有影响.