鲜切果蔬中4种病原微生物多重PCR检测技术

• 作者: 冯可 司琦 姜爱丽 徐永平 胡文忠 萨仁高娃 马新秀
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 多重PCR 快速检测 食源性病原微生物 鲜切果蔬
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 276-283
• 页数: 8页
• 分类号: TS207.4
• 字数: 5521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201806043

摘要

研发可同时检测鲜切果蔬中的单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157∶H7的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法.根据单核细胞性李斯特菌加inlA基因、鼠伤寒沙门菌invA基因、大肠杆菌O157∶H7 wzy基因、金黄色葡萄球菌nuc基因设计及筛选出4对引物.对多重PCR体系及条件进行优化.该方法对单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157∶H7的检出限分别为3.5×106、1.6×105、2.4×105、4.8×105 CFU/mL.将优化的多重PCR方法对不同接种量富集后验证,结果表明,经过9h富集后,该方法检出限为1CFU/mL.该方法在鲜切莴苣、鲜切黄瓜、鲜切木瓜、鲜切哈密瓜中应用同样可扩增出4条目标菌.因此,利用所建立的多重PCR方法对鲜切果蔬中侵染的病原菌检出限可达到1 CFU/g.该方法相较于传统的培养检测方法具有节约大量的劳力、试剂、时间等优点,检测时间也由原来的5～7 d缩短至9～11h,对于企业或分析检验中心大批量样品的监测具有指导意义.