N-糖基化对重组木聚糖酶XynA酶学特性的影响

• 作者: 张笑雨 李秀婷 杨然 高思宇
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: N-糖基化 木聚糖酶 衣霉素 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 137-143,160
• 页数: 8页
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.11.024

摘要

为实现木聚糖酶的高效表达,扩大实际生产应用,本实验将木聚糖酶基因xynA在毕赤酵母中进行重组表达,同时采用糖基化抑制剂衣霉素处理毕赤酵母细胞,以此来探讨N-糖基化对木聚糖酶XynA酶学性质的影响.结果表明,SDS-PAGE电泳图谱显示木聚糖酶XynA发生了N-糖基化修饰,分子量约为45 kDa,酶活为406.6 U/mL,最适pH及反应温度分别为5.0和65℃;而添加不同浓度衣霉素处理后的木聚糖酶最适pH不变,最适反应温度下降5℃,随着衣霉素浓度的增加,去糖基化的木聚糖酶酶活力、分泌量及温度稳定性均有所下降,且当衣霉素添加浓度为15 μg/mL时,剩余酶活为53.6％.去糖基化的木聚糖酶耐受胃蛋白酶的能力较糖基化的有所增强,Na+、K+、Li+、Ca2+、Al3+、EDTA相对于糖基化的木聚糖酶表现出了一定的激活作用.以上结果说明N-糖基化作为一种重要的翻译后修饰对木聚糖酶XynA的分泌及热稳定性有促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李秀婷	北京工商大学北京市食品风味化学重点实验室	57	547	14.0	21.0
5	杨然	北京工商大学北京市食品风味化学重点实验室	7	29	3.0	5.0
6	张笑雨	北京工商大学食品添加剂与配料北京高校工程研究中心	1	1	1.0	1.0
10	高思宇	北京工商大学食品添加剂与配料北京高校工程研究中心	1	1	1.0	1.0