血清非甲基化胰岛素DNA检测方法的建立

• 作者: 刘颖丰 周智广 林健 谢志国 黄干
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 糖尿病,1型 非甲基化胰岛素DNA 诊断技术和方法
• 年，卷（期）: 2018,（30）
• 所属期刊栏目: 糖尿病基础与临床
• 页码范围: 2393-2397
• 页数: 5页
• 字数: 3791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2018.30.005

摘要

目的 建立血清非甲基化胰岛素DNA的检测方法,并初步评价其临床应用价值.方法 对文献报道的Akirav法和Husseiny法反应体系进行验证和改良.同时选取2014年2月至2015年2月中南大学湘雅二医院门诊或病房诊断为1型糖尿病(T1DM)且病程1年以内的患者6例,以及年龄相匹配的健康对照8例,采用改良Akirav法检测其血清中非甲基化胰岛素DNA水平,初步评价临床应用价值.本研究方案经中南大学湘雅二医院伦理委员会批准[(2012)伦理审第(S12)号].结果 Akirav法的甲基化非依赖性PCR(MIP)反应特异性较差,无法获得目标产物;Husseiny法的甲基化特异性定量PCR(qMSP)引物扩增效率为(76.98 ±2.88)％,低于推荐的80％,结果可信度差.利用Akirav法的主要思路,结合Husseiny法中提供的引物,建立的改良Akirav法灵敏度较高,检测T1DM患者血清中的非甲基化胰岛素DNA水平高于正常对照[非甲基化指数(DI)分别为0.039(0.028 ～0.083)和0.016(0.003 ～0.029),P=0.005].结论 改良Akirav法能有效检测血清非甲基化胰岛素DNA水平,T1 DM患者血清中非甲基化胰岛素DNA水平高于健康人.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周智广	中南大学湘雅二医院代谢内分泌科糖尿病免疫学教育部重点实验室国家代谢性疾病临床医学研究中心	232	1953	20.0	39.0
2	谢志国	中南大学湘雅二医院代谢内分泌科糖尿病免疫学教育部重点实验室国家代谢性疾病临床医学研究中心	9	20	2.0	4.0
3	林健	中南大学湘雅二医院代谢内分泌科糖尿病免疫学教育部重点实验室国家代谢性疾病临床医学研究中心	16	60	4.0	7.0
4	刘颖丰	中南大学湘雅二医院代谢内分泌科糖尿病免疫学教育部重点实验室国家代谢性疾病临床医学研究中心	3	3	1.0	1.0
5	黄干		1	0	0.0	0.0