抗人FXYD6特异性多肽单克隆功能性抗体制备及生物学作用鉴定

• 作者: 刘汝海 张执全 李凤山 袁俊建 郭尧 郭忠健 陈雄飞
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 转运调节因子6 单克隆抗体 制备 生物学鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 1309-1313
• 页数: 5页
• 分类号: R73-3
• 字数: 4715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2018.10.004

摘要

目的 研制抗人转运调节因子(FXYD)6功能区单克隆抗体库,筛选分泌胞内、胞外区单克隆抗体的杂交瘤细胞株并对鉴定胞外区单克隆抗体生物学作用.方法 原核表达并纯化去除跨膜区域FXYD6功能区重组蛋白,FXYD6重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,多次筛选及克隆化,建立稳定分泌抗人FXYD6胞外区或胞内区的单克隆抗体杂交瘤.分别应用间接酶联免疫吸附法(ELISA)、Western blot和免疫组织化学法鉴定抗体特异性及亚型,细胞流式技术筛选可识别天然构象的胞外区单克隆抗体,用腹水诱导法对胞外区单抗进行制备、纯化并检测亲和常数,高表达FXYD6的HepG2细胞系检测胞外区单抗的功能.结果 成功获得分泌抗人FXYD6胞外区或胞内区单克隆抗体的杂交瘤细胞库,制备出具有功能阻断性的胞外区单抗.结论 制备的抗人FXYD6胞外区单抗可抑制HepG2细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘汝海	河北省沧州市中心医院普外一科	25	120	6.0	10.0
2	张执全	河北省沧州市中心医院普外一科	11	37	3.0	5.0
3	李凤山	河北省沧州市中心医院普外一科	9	48	4.0	6.0
4	郭忠健	河北省沧州市中心医院病理科	2	2	1.0	1.0
5	陈雄飞	河北省沧州市中心医院普外一科	2	0	0.0	0.0
6	袁俊建	河北省沧州市中心医院普外一科	1	0	0.0	0.0
7	郭尧	河北省沧州市中心医院中心实验室	1	0	0.0	0.0