电穿孔法转染脐带华通胶间充质干细胞的最佳条件

• 作者: 张宁坤 李春花 王泽 陈宇 高连如
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 电穿孔 电转染 华通胶间充质干细胞 华通胶 低氧培养 干细胞 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2018,（17）
• 所属期刊栏目: 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 2717-2721
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.0870

摘要

背景:脐带华通胶间充质干细胞是目前较为原始的干细胞,为当前干细胞的研究热点之一,是基因治疗的理想载体.然而,目前尚未有对脐带华通胶间充质干细胞电转染条件的研究,因此探索脐带华通胶间充质干细胞的电转染最佳条件占据重要地位.目的:探讨不同电穿孔条件对脐带华通胶间充质干细胞转染率的影响,以确定最佳电转染条件.方法:通过控制电压、脉冲时长及细胞状态等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒EEV-EGFP转入脐带华通胶间充质干细胞,流式细胞仪检测转染率.结果与结论:①电压自125 V至150 V,转染率呈现递增趋势,150 V时获得最大转染率,但将电压进一步调高至170 V,转染率开始显著降低;②脉冲时长为5.0 ms时获得最大转染率;脉冲时长为2.5 ms和7.5 ms时转染效率均有所降低;③与低氧培养比较,正常培养的细胞转染率更高;④结果表明,正常培养的脐带华通胶间充质干细胞在电压150 V、脉冲时长5.0 ms、脉冲间隔时间50 ms、脉冲数2次时可达到较高的电转染率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈宇	安徽医科大学海军临床学院	5	23	3.0	4.0
3	张宁坤	解放军海军总医院心血管内科	5	20	2.0	4.0
4	高连如	解放军海军总医院心血管内科	12	90	5.0	9.0
5	王泽	安徽医科大学海军临床学院	2	8	1.0	2.0
9	李春花	解放军海军总医院心血管内科	1	0	0.0	0.0