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稳定表达HMGA2的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建
稳定表达HMGA2的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建
作者:
于林
刘娇娇
张慧变
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
高迁移率族蛋白A2
乳腺肿瘤
乳腺癌
摘要:
目的 构建人乳腺癌MDA-MB-231细胞人类高迁移率族蛋白A2(HMGA2)稳定表达株.方法 取对数生长期MDA-MB-231细胞,提取细胞总RNA,逆转录含HMGA2基因的cDNA;以cDNA为模板,根据其CDS序列设计含有EcoR1、BamH1限制性内切酶位点的引物序列,采用PCR法扩增出带有双酶切位点的HMGA2目的基因;采用双酶切法将目的片段连接到慢病毒表达质粒pLVX-IRES-Puro中,获得重组的pLVX-HMGA2表达载体.pLVX-HMGA2表达载体、包装质粒共转染人肾上皮细胞系293T,提取携带HMGA2的重组慢病毒.采用菌液PCR、重组质粒双酶切、质粒PCR验证及测序比对鉴定获得的重组质粒.取适量对数生长期MDA-MB-231细胞,分为两组,观察组、对照组分别感染重组慢病毒Plv-HMGA2、空载慢病毒Plv-Vector,感染48 h加入1μg/mL嘌呤霉素筛选.分别采用实时荧光定量PCR法、Western blotting法检测细胞HMGA2 mRNA、蛋白.结果 观察组、对照组细胞HMGA2 mRNA相对表达量分别为10273.93±4290.77和1.18±0.81,二者比较,P<0.05.观察组、对照组细胞HMGA2蛋白相对表达量分别为1.570±0.080和0.110±0.002,二者比较,P<0.05.结论 成功构建MDA-MB-231细胞HMGA2稳定表达株.
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篇名
稳定表达HMGA2的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建
来源期刊
山东医药
学科
生物学
关键词
高迁移率族蛋白A2
乳腺肿瘤
乳腺癌
年,卷(期)
2018,(31)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
13-16
页数
4页
分类号
Q591.2|Q784
字数
3978字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1002-266X.2018.31.004
五维指标
作者信息
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姓名
单位
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1
刘娇娇
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研究主题发展历程
节点文献
高迁移率族蛋白A2
乳腺肿瘤
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研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
山东医药
主办单位:
山东卫生报刊社
出版周期:
周刊
ISSN:
1002-266X
CN:
37-1156/R
开本:
大16开
出版地:
济南市燕东新路6号
邮发代号:
24-8
创刊时间:
1957
语种:
chi
出版文献量(篇)
55362
总下载数(次)
42
总被引数(次)
199298
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