胃癌组织中胃癌相关成纤维细胞、胃正常成纤维细胞的分离鉴定及增殖情况观察

• 作者: 刘燕 刘珺 孙伟 封兰兰 朱吉海 赵珺
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 癌相关成纤维细胞 正常成纤维细胞 细胞角蛋白18 波形蛋白 α-平滑肌肌动蛋白 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2018,（31）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R36
• 字数: 3813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2018.31.002

摘要

目的 从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能.方法 3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织.采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜组织中的胃NFs.原代培养胃CAFs、胃NFs,差速贴壁传代法分离并纯化细胞,差速贴壁20 min.倒置显微镜下观察胃CAFs、胃NFs细胞形态,采用免疫细胞化学染色法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK18)、波形蛋白(Vimentin).取3个来源分离的胃CAFs、胃NFs,分别于细胞贴壁24 h、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d采用MTT法测算细胞光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线.结果 胃癌CAFs细胞大小不一,呈梭形或星形,排列不规则并呈重叠生长;胃NFs细胞均匀一致,呈长梭形,排列规则.胃CAFs细胞存在α-SMA、Vimentin阳性表达,CK18阴性表达,胃NFs细胞存在Vimentin阳性表达,α-SMA、CK18阴性表达.培养3～6天,各来源胃CAFs细胞OD值均高于胃NFs(P均<0.05).结论 成功分离胃CAFs、胃NFs.胃CAFs、胃NFs均存在Vimentin表达.胃CAFs增殖能力优于胃NFs.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙伟	青海大学医学院	17	41	3.0	5.0
2	赵珺	青海大学医学院	9	6	1.0	2.0
3	刘燕	青海大学医学院	87	220	7.0	9.0
4	朱吉海	青海大学医学院	15	35	3.0	5.0
5	刘珺	青海大学医学院	4	3	1.0	1.0
6	封兰兰	青海大学医学院	3	4	1.0	2.0