微血管内皮细胞对小鼠造血干细胞增殖的影响

• 作者: 李晓明 杨敏 林凡莉 汪姝玥 钱怡 黄纯兰
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 微血管内皮细胞 造血干细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2018,（18）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 2408-2412,2417
• 页数: 6页
• 分类号: R551.3
• 字数: 4825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2018.18.004

摘要

目的 探索微血管内皮细胞(MECs)对造血干细胞(HSCs)增殖的影响,以建立一种促进HSCs增殖的方法.方法 选取C57BL/6小鼠和C57系GFP小鼠,处死获取肺叶组织.(1)MECs的分离、培养和鉴定:肺组织经Ⅰ型胶原酶消化获得的细胞在含20％胎牛血清(FBS)、2 ng/mL血管内皮生长因子(VEGF)、100U/mL肝素、0.1 mg/mL青霉素及链霉素的DMEM-F12培养基培养,第8天进行CD31荧光鉴定,“铺路石”细胞用于共培养并以流式细胞仪(FCM)检测八因子相关抗原(vWF)、CD31、CD34、CD45表达率.(2)GFP小鼠HSCs的分离、鉴定:密度梯度离心法和MACs-CD117+磁珠法分选HSCs,FCM检测纯度及CD117 CD34共表达率.(3)MECs促HSCs增殖:设立对照组(HSCs)、共培养组(MECs+ HSCs),培养7d,观察HSCs生长情况并计数、计算扩增倍数;第7天,收集共培养组HSCs,FCM检测CD117 CD34共表达率.结果 (1)肺MECs:第3天形成细胞簇,第6天成“血管样”改变,第14天为“铺路石”外观.培养第8天CD31阳性率为54.5％.vWF、CD31、CD34、CD45阳性率分别为81.39％、45.80％、57.48％、0.17％.(2)平均每只小鼠骨髓经MACs分选后可获约4.7×105个CD117+细胞,纯度为99.51％.(3)随着培养时间的延长,两组HSCs计数均有所增加,但共培养组HSCs扩增倍数大于对照组(P＜0.05).第1～7天共培养组与对照组细胞数相对变化倍数分别为1.21、1.35、1.50、1.72、1.71、1.75和1.78(P＜0.05),第4天变化最明显.共培养7d后HSCs的CD117 CD34共表达率为92.06％.结论 MECs对HSCs增殖有促进作用,共培养第4天促进作用最明显,并且MECs可以促进HSCs CD34的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓明	西南医科大学附属医院血液内科	49	84	5.0	7.0
2	杨敏	西南医科大学附属医院血液内科	22	28	3.0	5.0
3	钱怡	西南医科大学附属医院血液内科	4	2	1.0	1.0
4	林凡莉	西南医科大学附属医院血液内科	8	4	1.0	2.0
5	汪姝玥	西南医科大学附属医院血液内科	5	4	1.0	2.0
6	黄纯兰	西南医科大学附属医院血液内科	19	11	2.0	2.0