miR-495在骨肉瘤细胞中表达变化、对MG-63细胞增殖的影响及其机制

• 作者: 夏海 孙英华 宫锦蕾 张兆卿 王复超 王美凤 邢国英
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 骨肉瘤细胞 微小RNA-495 细胞增殖 高迁移率族蛋白A2
• 年，卷（期）: 2018,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R738.1
• 字数: 3839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2018.23.005

摘要

目的 观察miR-495在骨肉瘤细胞中的表达变化及其对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响,并探讨可能的分子机制.方法 采用real-time PCR法检测人骨肉瘤细胞系Saos-2、U20S、MG-63及人成骨细胞hFOB1.19中的miR-495.将MG-63细胞分为阴性对照组、miR-495 mimics组、miR-495 mimics+HMGA2组,分别转染mimics-NC、miR-495 mimics、miR-495 mimics+HMGA2表达质粒,转染24、48、72、96 h后,采用CCK-8法检测MG-63细胞增殖能力.应用靶基因在线预测数据库miRanda并结合基因的功能分析进行miR-495的靶基因预测.采用双荧光素酶报告实验验证miR-495与靶基因的结合位点.采用Western blotting法验证miR-495对高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达的靶向调控作用.结果 Saos-2、MG-63、U20S细胞中miR-495的相对表达量低于hFOB1.19细胞(P均<0.01).转染48、72、96 h后miR-495 mimics组MG-63细胞OD值低于阴性对照组组,miR-495 mimics+HMGA2组MG-63细胞OD值高于miR-495 mimics组(P均<0.01).双荧光素酶报告实验结果提示miR-495可与HMGA2的3′UTR区特异性结合,从而显著抑制荧光素酶活性.miR-495 mimics组MG-63细胞中HMGA2蛋白的相对表达量低于mimics-NC组,miR-495 mimics+HMGA2组MG-63细胞中HMGA2蛋白的相对表达量高于miR-495 mimics组(P均<0.01).结论 骨肉瘤细胞中miR-495的表达水平低于正常成骨细胞;上调miR-495表达后骨肉瘤细胞增殖受到抑制;miR-495可能通过靶向调控HMGA2表达从而抑制骨肉瘤细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王复超		6	6	2.0	2.0
2	张兆卿		5	7	2.0	2.0
3	孙英华		13	30	4.0	5.0
4	夏海		5	6	2.0	2.0
5	王美凤		3	3	1.0	1.0
6	邢国英		3	3	1.0	1.0
7	宫锦蕾		3	3	1.0	1.0