D-半乳糖诱导小鼠原代皮肤成纤维细胞衰老模型的建立

• 作者: 唐春女 张鑫 林毓君 潘璐璐 莫书荣 鲁晴 黄华生 黎静
• 来源期刊: 现代医药卫生
• 关键词: 半乳糖 细胞衰老 成纤维细胞 基因,p53 Sirt1蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（21）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3268-3270,3274
• 页数: 4页
• 字数: 3332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5519.2018.21.002

摘要

目的 构建D-半乳糖诱导小鼠皮肤成纤维细胞(MSF)衰老模型.方法 取5～7 d昆明乳鼠背部皮肤,采用Ⅰ型胶原酶消化法分离获得MSF,通过形态学观察及Vimentin免疫组织化学法鉴定MSF细胞.分别用不同浓度D-半乳糖诱导MSF细胞0、24、48 h,采用β-半乳糖苷酶衰老染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测衰老相关基因p53、细胞免疫荧光法分析Sirt1基因表达水平,并分析细胞衰老情况.结果 光学显微镜下细胞呈多突的梭形或星形的扁平细胞,Vimentin蛋白免疫组织化学分析呈阳性.β-半乳糖苷酶衰老染色实验结果显示,不同浓度D-半乳糖诱导后染色阳性细胞数量较对照组显著增多,差异有统计学意义(P<0.01).在D-半乳糖(20 g/L)诱导24、48 h后,与对照组比较,衰老MSF p53基因表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);细胞免疫荧光结果显示,D-半乳糖诱导48 h后Sirt1蛋白表达水平明显降低.结论 通过Ⅰ型胶原酶消化法及D-半乳糖诱导法成功建立了衰老模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫书荣	广西医科大学生理教研室	55	278	9.0	14.0
2	黎静	广西医科大学生理教研室	34	161	8.0	10.0
3	鲁晴	广西医科大学生理教研室	2	1	1.0	1.0
4	张鑫	广西医科大学生理教研室	11	21	2.0	4.0
5	黄华生	广西医科大学生理教研室	2	1	1.0	1.0
6	林毓君	广西医科大学生理教研室	1	1	1.0	1.0
7	唐春女	广西医科大学生理教研室	1	1	1.0	1.0
8	潘璐璐	广西医科大学生理教研室	1	1	1.0	1.0