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摘要:
目的 探讨雌激素调节载脂蛋白M的机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测不同浓度牛血清清蛋白结合雌激素(E2-BSA)处理HepG2细胞24 h后载脂蛋白M(ApoM)的表达;RT-PCR检测不同雌激素和雌激素受体α(ER-α)拮抗剂MPP共同处理HepG2细胞24 h后ApoM mRNA的表达;PCR扩增ER-α全基因和ApoM转录起始位点上游2000 bp与下游+2000 bp之间不同长度片段,连入荧光素酶报告基因质粒pGL3-basic,各重组质粒转染后对表达荧光素活性进行检测;凝胶迁移实验和染色质免疫共沉淀进一步验证ER-α和ApoM启动子区的相互作用.结果 E2-BSA呈剂量依赖性上调HepG2细胞ApoM的表达,这一效应可以被MPP所抑制;通过荧光素酶报告基因实验鉴定出ApoM基因启动子区存在明显促进基因转录的调控区域[-1580~-1575 bp(-GGTCA-)].对该区域序列定点突变后重组荧光素酶报告基因表达的荧光素酶活性下降,而共转染未突变的荧光素酶报告基因质粒则荧光素酶活性上升;凝胶迁移阻滞和染色质免疫共沉淀结果显示,雌激素受体α与该区域特定序列存在相互作用.结论 雌激素通过ER-α上调载脂蛋白M的表达.
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转染
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文献信息
篇名 雌激素通过雌激素受体α上调载脂蛋白M的表达
来源期刊 现代医药卫生 学科
关键词 雌激素类 雌激素受体α 载脂蛋白M 凝胶迁移实验 染色质免疫共沉淀
年,卷(期) 2018,(21) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 3310-3314
页数 5页 分类号
字数 4919字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-5519.2018.21.013
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张俊 苏州大学附属第三医院综合实验室 66 258 9.0 13.0
2 张晓膺 苏州大学附属第三医院综合实验室 91 404 10.0 16.0
3 罗光华 苏州大学附属第三医院综合实验室 86 240 7.0 11.0
4 于洋 苏州大学附属第三医院综合实验室 21 54 3.0 6.0
5 魏江 苏州大学附属第三医院综合实验室 21 72 4.0 7.0
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载脂蛋白M
凝胶迁移实验
染色质免疫共沉淀
研究起点
研究来源
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研究去脉
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现代医药卫生
半月刊
1009-5519
50-1129/R
大16开
重庆市渝中区人民路148号
78-47
1985
chi
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49603
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