ONECUT1重组质粒构建及其对细胞应激相关基因表达的影响

• 作者: 余世荣 余绪明 张晓燕 王佳 石金敏
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 同源域蛋白 ONECUT1基因 氧化应激 内质网应激
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 32-34
• 页数: 3页
• 分类号: R394.8
• 字数: 3018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2018.05.009

摘要

目的 构建ONECUT1重组质粒,并探讨其重组对细胞应激相关基因表达的影响.方法 用重组DNA技术及RT-PCR法体外构建人源ONECUT1-pcDNA3.1(-)表达质粒,并测序.将培养好的U251细胞随机分为转染组、空载组,分别转染ONECUT1重组质粒及空载质粒.采用qRT-PCR法检测两组细胞内线粒体抗氧化应激相关基因(SOD1、CAT、GPX1、PRDX1、SIRT1、NQO1、GcLm、GcLc、NRF2、KEAP1、PARK7)及内质网应激相关基因(MANF、PERK、IRE1α、ATF6)的表达.结果 电泳结果显示,在DNA Marker 1 000 ～1 500 bp出现单带,即为插入的全部CDS序列,1 398 bp,测序证实质粒构建成功.与空载组比较,转染组线粒体抗氧化应激相关基因CAT、PRDX1、SIRT1、NQO1、GcLm、GcLc、PARK7表达上调(P均＜0.05),SOD1、GPX1、NRF2、KEAP1表达差异无统计学意义(P均＞0.05).与空载组比较,转染组内质网应激相关基因MANF、IRE1 α、PERK、ATF6表达差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 成功构建ONECUT1重组质粒,ONECUT1可使细胞内部分抗氧化应激相关基因表达上调,但对内质网应激相关基因的表达无影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余世荣		11	28	4.0	5.0
2	张晓燕		27	164	6.0	12.0
3	石金敏		8	24	3.0	4.0
4	王佳		10	43	3.0	6.0
5	余绪明		5	35	2.0	5.0