[目的]建立一种高压液相色谱-串联质谱同时测定婴幼儿配方奶粉中7种B族维生素(核黄素、硫胺素、吡哆醇、吡哆胺、吡哆醛、烟酸、烟酰胺)含量的方法.[方法]样品用0.1%甲酸溶液溶解后,加入一定体积的正己烷,经过超声、离心、过滤处理.用0.1%甲酸-甲醇为流动相(梯度洗脱),Eclipse Plus C18色谱柱为分析柱,对滤液进行分离.采用电喷雾正离子模式,多重反应监测(MRM)对7种B族维生素进行检测.[结果]7种B族维生素在5 min内能较好分离,在一定的浓度范围内线性良好,相关系数(R2)均大于0.99,样品加标回收率(3个加标水平)为75.25% ~107.65%,相对标准偏差在3%以下.[结论]该方法具有操作简单、分离度好、灵敏度高、检测速度快等优点,可用于婴幼儿配方奶粉中B族维生素含量的检测.