重组截短型TGF-β前体潜在相关肽的原核表达及其对HSC-T6细胞增殖的影响

• 作者: 刘增瑞 初彦辉 曹雅男 李玲玉 李鲁新 王晶 石永萍 郑俊雅
• 来源期刊: 中国当代医药
• 学科: 医学
• 关键词: TGF-β前体潜在相关肽 原核表达 蛋白纯化 HSC-T6 增殖
• 年，卷（期）: 2018,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 字数: 2777字
• 语种: 中文

摘要

目的 初步研究截短型TGF-β前体潜在相关肽(LAP)的重组蛋白对HSC-T6细胞增殖的影响.方法 PCR扩增截短型LAP片段,构建该片段的原核表达载体,经双酶切、DNA测序鉴定后,IPTG 0.5 mmol/L,37℃,4h诱导出蛋白的大量表达,表达的蛋白经SDS-PAGE,Western blot检测,经镍琼脂糖亲和层析纯化重组蛋白,将重组蛋白作用于大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6),用MTT法检测不同浓度重组蛋白对细胞增殖作用的影响.结果 原核表达载体构建成功,成功表达、纯化了重组蛋白,且HSC-T6细胞的增殖程度随重组蛋白浓度的增加而降低.结论 重组蛋白可抑制HSC-T6细胞的增殖,为后续研究LAP片段对TGF-β活化过程的干扰作用及对器官纤维化的影响奠定基础.