利用HiTAIL-PCR技术鉴定T-DNA在RNAi-OsRhoGAP2水稻中的插入位点

• 作者: 安文静 彭静静 李佳佳 杜京尧 梁卫红 王美娜 王高华 石佳 葛慧雯 闫鑫甜
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: OsRhoGAP2基因 HiTAIL-PCR 侧翼序列 T-DNA 转基因水稻 插入位点
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 55-59
• 页数: 5页
• 分类号: Q754|S511.01
• 字数: 3469字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2018.09.011

摘要

水稻OsRhoGAP2基因是前期从幼穗cDNA文库中筛选获得的功能未知基因,采用DNA重组技术构建OsRhoGAP2基因RNA干扰载体,并转化水稻.对转基因水稻的表型分析显示,OsRhoGAP2基因RNA干扰水稻株高显著高于对照水稻.采用高效热不对称交错PCR法(HiTAIL-PCR)对RNAi-OsRhoGAP2转基因水稻T-DNA插入位点的侧翼序列进行分析,利用特异性嵌套引物扩增,结合序列对比分析,发现在4个不同的转基因水稻株系中,T-DNA均插入到水稻OsRhoGAP2基因的第5个外显子内,本研究将为后续对该基因的功能鉴定提供重要依据.