慢病毒介导的CRISPR/Cas9敲除TGF-β1基因对鹿茸软骨细胞增殖的影响

• 作者: 刘明晓 刘洪运 李月 胡薇 陈丹阳 韩香玉
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 鹿茸软骨细胞 转化生长因子β1 CRISPR/Cas9 慢病毒
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 页码范围: 96-100
• 页数: 5页
• 分类号: S825|Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5382.2019.01.019

摘要

为探究TGF-β1基因在鹿茸快速生长期的作用,利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,设计并构建3条靶向梅花鹿TGF-β1基因第1外显子的gRNA寡核苷酸序列,在人胚肾细胞293T内进行慢病毒包装,通过neo抗性筛选稳转细胞株.提取稳转细胞株总蛋白,经BCA法测定总蛋白质量浓度,Western Blot检测TGF-β1蛋白的相对表达水平;MTT法检测TGF-β1基因敲除对鹿茸软骨细胞体外增殖的影响.结果表明:成功构建了靶向梅花鹿TGF-β1的CRISPR/Cas9基因敲除载体pBOBI-gRNA2.TGF-β1基因的缺失抑制了鹿茸软骨细胞的体外增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡薇		44	146	7.0	9.0
2	李月		3	3	1.0	1.0
3	韩香玉		6	14	3.0	3.0
4	刘明晓		4	3	1.0	1.0
5	陈丹阳		2	3	1.0	1.0
6	刘洪运		3	3	1.0	1.0