犬瘟热病毒截短P蛋白的表达及纯化

• 作者: 易立 曹智刚 李爽 林鹏 程世鹏 程悦宁
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 重组P蛋白 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 81-86
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4033字
• 语种: 中文

摘要

为获得犬瘟热病毒(CDV)野毒株截短磷蛋白(aa232～507),以Asia 1型CDV-PS为基础,经PCR扩增得到P(aa232～507)基因,插入原核表达载体pEASYR-Blunt E1中,构建重组原核表达载体pEASYR-Blunt E1-CDV-P;将重组质粒转化到BL21感受态细胞中进行原核表达并对诱导条件进行优化;超声破碎最佳条件下的诱导产物经离心后对重组蛋白进行可溶性分析,随后用镍柱对重组截短P蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.结果 显示:重组P蛋白大小约37 kDa,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间为8h时,表达量最高;重组P蛋白以包涵体形式存在,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,成功纯化出重组截短P蛋白;重组P蛋白具有良好的免疫反应性.本研究成功制备出CDV-PS截短P蛋白,为进一步P蛋白抗原表位的研究和CDV抗体诊断方法的研发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程世鹏	中国农业科学院特产研究所	49	134	7.0	9.0
2	程悦宁	中国农业科学院特产研究所	20	17	2.0	3.0
3	易立	中国农业科学院特产研究所	24	48	4.0	6.0
4	林鹏	中国农业科学院特产研究所	6	20	4.0	4.0
5	李爽	中国农业科学院特产研究所	19	35	3.0	5.0
6	曹智刚	中国农业科学院特产研究所	2	2	1.0	1.0