猪源CD163受体蛋白多克隆抗体的制备及其PRRSV阻断效力研究

• 作者: 余文兰 刘永伦 夏兆伦 徐铮 舒会友 马晓莉
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: CD163受体蛋白 原核表达 弗氏佐剂 多克隆抗体 病毒阻断效力
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 76-80
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3420字
• 语种: 中文

摘要

为了制备猪源CD163受体蛋白鼠源多克隆抗体并检验其病毒阻断效力,采用RT-PCR方法扩增了猪肺泡巨噬细胞(PAM) CD163受体SRCR4-6功能区域片段,将其克隆至载体pET-32a中,并在大肠杆菌中表达重组CD163受体蛋白,纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂充分混合乳化;采用皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后获得多克隆抗体,应用间接ELISA方法检测抗体含量,以病毒阻断试验和间接免疫荧光法验证其病毒阻断效力.结果 显示:重组蛋白主要以包涵体的形式表达,相对分子量约为50 kDa,制备的CD163受体蛋白多克隆抗体含量较高,经2～8倍稀释后,抗体阻断PRRSV感染细胞的能力逐渐下降.研究表明,在大肠杆菌中成功表达了PRRSV重组CD163受体蛋白,制备的鼠源多克隆抗体具有较明显的阻断PRRSV感染细胞的效力.本研究为深入研究病毒的入侵机制和PRRSV的防控提供了试验基础和新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	舒会友		4	1	1.0	1.0