对虾白斑综合征病毒可视化环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法的建立

• 作者: 吴丽云
• 来源期刊: 渔业研究
• 学科: 农学
• 关键词: 对虾 白斑综合征 环介导等温扩增 快速检测
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论文与报告
• 页码范围: 478-486
• 页数: 9页
• 分类号: S917.4
• 字数: 6494字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14012/j.cnki.fjsc.2019.06.003

摘要

根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)基因保守序列,利用PrimerExplorer V4设计合成4套环介导等温扩增(Loop mediated isothermal amplification,LAMP)特异性引物,每套引物包含两条内引物(FIP和BIP)、两条外引物(F3和B3)和一条环引物(LF或LB).利用钙黄绿素作为检测指示剂,建立了可视化WSSV的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.以构建的pMD18-WSSV重组质粒为标准模板进行10倍梯度稀释,测定LAMP对WSSV核酸的最低检测限,4套引物组分别建立LAMP方法均在63℃恒温条件反应60 min,结果显示WSSV-2、WSSV-3和WSSV-4的最低检测限分别为2.25 ～0.225、2.25 ～0.225和225～ 22.5 copies/μL.本研究建立的LAMP方法在1h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果,适用水产养殖的现场检测,为WSSV早期感染的快速检测提供了方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴丽云	福建省水产研究所福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室	3	0	0.0	0.0