尼罗罗非鱼ZAP-70蛋白的原核表达、纯化及其多抗制备

• 作者: 冯鹏霏 张永德 林勇 潘传燕 罗洪林 苏乾莲
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 罗非鱼 ZAP-70 原核表达 多克隆抗体 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-22
• 页数: 7页
• 分类号: S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.01.0004

摘要

[目的]构建尼罗罗非鱼ZAP-70原核表达载体,纯化其重组蛋白并制备多克隆抗体.[方法]采用无缝克隆技术构建尼罗罗非鱼ZAP-70重组表达载体,并转人大肠杆菌B21中诱导表达,将表达的ZAP-70蛋白免疫日本大耳兔得到多克隆抗体,采用Western Blotting和ELISA技术鉴定抗体的特异性和效价.[结果]成功构建原核表达重组质粒pET-B2m-ZAP-70,诱导表达的重组蛋白分子量约为39 kDa,主要以包涵体的形式表达;获得效价为1∶512 000的多克隆抗血清,WB检测显示该抗体能够特异性的识别所表达的ZAP-70重组蛋白.[结论]尼罗罗非鱼ZAP-70重组质粒在大肠杆菌B21中高效表达,分子量约为39 kDa,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步探索ZAP-70在尼罗罗非鱼免疫系统中的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林勇		36	214	8.0	13.0
2	张永德		22	113	5.0	10.0
3	冯鹏霏		17	44	4.0	5.0
4	潘传燕		6	3	1.0	1.0
5	罗洪林		8	10	2.0	2.0
6	苏乾莲		2	0	0.0	0.0