二化螟实时荧光定量PCR内参基因筛选和表达稳定性评价

• 作者: 吕仲贤 徐红星 杨亚军 王国荣 田俊策 郑许松 鲁艳辉
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 二化螟 内参基因 荧光定量PCR 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 75-84
• 页数: 10页
• 分类号: Q755|S435.112+.1
• 字数: 6471字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16819/j.1001-7216.2019.8035

摘要

[目的]筛选特定试验条件下二化螟(Chilo suppressalis)稳定表达的内参基因,为二化螟基因表达研究奠定基础.[方法]根据二化螟转录组测序结果挑选出11个候选基因,利用实时荧光定量PCR测定其在二化螟不同发育历期、不同组织、温度处理、杀虫剂处理、取食不同饲料、取食不同水稻、dsRNA处理和混合样品的表达量,利用RefFinder、BestKeeper、GeNorm和NormFinder等软件和ΔCt值对11个候选基因的稳定性进行评估.[结果]5种分析方法表明,在二化螟不同发育历期稳定性较高的内参基因是AK、RPL10和EF1,不同组织中稳定性较高的内参基因是EF1、TUB和ACTB,不同温度下较稳定的内参基因为TUB、RPL10和EF1,杀虫剂处理样品中较稳定的是TF4和ACTA,取食不同饲料较稳定的是TUB、TF4、EF1和RPL10,取食不同品种水稻较稳定的是TUB和EF1,dsRNA处理样品中较稳定的是TUB、AK、ACTB和EF1,混合样品中较稳定的是EF1、TUB和ACTB.[结论]为不同试验条件下选择合适的内参基因提供了参考,也有利于在二化螟基因表达研究中获得更加可靠准确的数据.