低频脉冲电磁场对大鼠成骨细胞骨形成的影响及作用机制

• 作者: 周建 王媛媛 石文贵 葸慧荣 陈克明
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 低频脉冲电磁场 大鼠成骨细胞 初级纤毛 环磷酸腺苷 蛋白激酶A 环磷腺苷效应结合蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-27
• 页数: 7页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.10149

摘要

目的 观察低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞(ROBs)骨形成的影响,探讨了环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应结合蛋白(CREB)信号通路的作用机制.方法 取新生Wistar大鼠颅骨,通过多次酶消化法获得ROBs并进行传代融合.采用50 Hz0.6 mT PEMFs处理3、6、9d后,检测ROBs内的碱性磷酸酶(ALP)浓度;处理0、15、30、60、90、120 min后,检测ROBs内骨形成相关因子(RUNX2)和成骨相关转录因子(OSX)蛋白表达,cAMP浓度,p-PKA、p-CREB和CREB蛋白表达.观察p-CREB核转位情况.采用RNA干扰法干扰IFT88后,检测ROBs内RUNX2、OSX、p-PKA和p-CREB蛋白表达情况.结果 PEMFs处理ROBs 3、6、9d后,ALP活性值分别为24.356±4.911、37.688±2.151和39.922±5.486,均明显高于相应对照组的18.531±2.401(P=0.0121)、33.675±4.366 (P =0.0324)和36.574±1.339 (P =0.0134).PEMFs处理30 (P =0.0042和P=0.0058)、60(P=0.0097和P =0.0079)、90 mn (P =0.0083和P=0.0098)时,ROBs内的RUNX2和OSX活性均显著高于未处理组;PEMFs处理30(P =0.0012)和60 min (P=0.0035)时,ROBs内的cAMP浓度明显高于未处理时;PEMFs处理15 (P =0.0018)、30 (P=0.0087)、90(P=0.0250)和120 min (P=0.0350)时,ROBs内的p-PKA水平明显高于未处理组;PEMFs处理15 (P=0.0075)、30 (P =0.0017)、60 (P=0.0074)和90 min (P =0.0096)时,ROBs内的p-CREB水平明显高于未处理组.PEMFs处理ROBs 15 min后,CREB发生磷酸化并聚集于细胞核内.将PKA、p-PKA与初级纤毛共定位染色,结果发现p-PKA定位于初级纤毛上.RNA干扰去除初级纤毛后,干扰组的p-PKA(F=78.602,P=0.0270)和p-CREB(F=76.082,P=0.0089)蛋白表达量及RUNX2(F=41.064,P=0.0230)和OSX (F =57.524,P=0.0310)蛋白表达量均明显低于未干扰组.结论 PEMFs可能是通过初级纤毛相关的cAMP/PKA/CREB信号通路促进ROBs骨形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王媛媛	中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院骨科研究所	18	66	5.0	7.0
2	周建	中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院骨科研究所	6	11	2.0	3.0
3	陈克明	中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院骨科研究所	6	39	2.0	6.0
4	葸慧荣	中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院骨科研究所	2	3	1.0	1.0
5	石文贵	中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院骨科研究所	1	2	1.0	1.0