XRCC1基因在乳腺癌中表达的临床意义及其细胞与分子机制

• 作者: 刘峰 吴海龙 唐璇 孙建兵
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 基因表达 细胞增殖 细胞运动 预后 X线修复交叉互补蛋白1
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 30-40
• 页数: 11页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2019.33.504

摘要

目的:探讨乳腺癌中X线修复交叉互补蛋白1 (X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)的表达及其与临床病理特征的关系,同时分析XRCC1基因过表达对人乳腺癌MB-231细胞增殖和迁移的影响及其分子机制.方法:采用实时荧光定量PCR法检测XRCC1 mRNA在人乳腺癌细胞系和组织中的表达水平.免疫组织化学法检测XRCC1蛋白在人乳腺癌组织中的表达情况,并统计分析乳腺癌组织中XRCC1表达与患者临床病理特征的关系.转染pcDNA3.1(+)-Flag-XRCC1重组质粒使乳腺癌MB-231细胞中XRCC1的表达上调,然后采用CCK-8法和软琼脂平板克隆形成实验检测细胞增殖活性的变化,FCM法检测细胞周期和凋亡的变化,Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力的变化,蛋白质印迹法检测XRCC1过表达对细胞周期、凋亡和迁移相关蛋白表达的影响.结果:与正常乳腺上皮细胞相比,XRCC1 mRNA在大多数乳腺癌细胞系中表达水平明显下调(P值均＜ 0.001).与正常乳腺上皮和配对癌旁组织相比,XRCC1 mRNA和蛋白在人乳腺癌组织中均表达下调(P值均＜0.001);同时XRCC1 mRNA的表达水平与乳腺癌患者预后呈正相关性(γ2=0.052,P=0.046),而XRCC1蛋白表达与肿瘤直径、淋巴结转移、组织学分级及TNM分期具有相关性(P值均＜0.05).过表达XRCC1基因后,乳腺癌MB-231细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均受到明显抑制(P值均＜ 0.01),而且细胞周期被明显阻滞于G1期(P＜0.001),细胞凋亡率则明显升高(P＜0.001).XRCC1过表达能促进细胞周期相关蛋白p21、p27、Bax和剪切型caspase 3,以及迁移相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,同时明显下调细胞周期蛋白依赖性激酶4/6 (cyclin-dependentkinase 4/6,CDK4/6)、细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)、Bcl-2、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达(P值均＜0.001).结论:XRCC1在乳腺癌细胞系和组织中表达下调,其表达水平与乳腺癌患者预后呈正相关性.恢复XRCC1基因表达能抑制细胞生长、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡.因此,XRCC1可能作为一个潜在的抑癌基因,参与乳腺癌的发生与发展进程.