探测应答调控蛋白PhoBNF20D自由态中存在的Pre-Active构象

• 作者: 刘乙祥 刘买利 刘兴弘 姜凌 寇新慧 李从刚
• 来源期刊: 波谱学杂志
• 学科: 物理学
• 关键词: BeF3- 活性构象 核磁共振(NMR) 应答调控蛋白 双组分信号转导系统(TCS)
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 164-171
• 页数: 8页
• 分类号: O482.53
• 语种: 中文
• DOI: 10.11938/cjmr20182639

摘要

PhoB是PhoR/PhoB双组分信号转导系统(TCS)中的应答调控蛋白,来自大肠杆菌,可以参与环境中自由Pi的调控应答.PhoB拥有保守的磷酸化位点D53,当Mg2+存在时,会变成活性构象,但是其中的机理尚不清楚.目前已经有报道指出,自由态的应答调控蛋白存在少量的活性构象,而且它们和蛋白的激活过程相关,但是这种活性构象一般不稳定,很难观测到.本文以PhoBNF20D作为模型,1H-15N HSQC和19F NMR谱图显示,自由态PhoBNF20D在溶液中存在pre-active构象,BeF3-可以稳定这种活性构象,而且Mg2+可以促进非活性构象到活性构象之间的转化,在BeF3-存在的情况下可以使PhoBNF20D形成完全的活性构象.同时我们利用Carr-Purcell-Meiboom-Gill(CPMG)弛豫弥散实验证明了PhoBNF20D存在两态交换.