芋疫霉菌的巢式PCR检测

• 作者: 丁雪玲 兰成忠 卢学松 姚锦爱 蒋军喜
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 芋疫霉菌 特异引物 巢式PCR 分子检测
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 76-82
• 页数: 7页
• 分类号: S435.72
• 字数: 5696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.01.012

摘要

[目的]建立芋疫霉菌快速、准确的PCR检测技术,为芋疫病流行规律监测和综合防控提供科学依据.[方法]根据芋疫霉菌与其他疫霉菌种类Y p t1基因序列差异,设计了1对芋疫霉菌PCR检测特异引物PCOF/PCOR,并对该引物的特异性、灵敏性和应用性进行了验证.[结果]在优化的反应体系与扩增条件下,PCOF/PCOR引物能特异性地从芋疫霉菌基因组DNA中扩增出1条172 bp的条带,而其他供试病原菌均无扩增条带.在25μL PCR反应体系中,PCOF/PCOR引物对芋疫霉菌基因组DNA的检测灵敏度为100 pg,而以疫霉菌Ypt1基因通用引物ph1F/Yph2R为第一轮引物,PCOF/PCOR为第二轮引物,进行巢式PCR扩增,能检测到10 fg芋疫霉菌基因组DNA,检测灵敏度提高了10000倍.采用巢式PCR,可从芋疫病发病的叶片和未显症叶片组织中检测到芋疫霉菌,检出率分别为100％ 和57.5％.[结论]所建立的巢式PCR可应用于芋疫霉菌的快速、特异和高灵敏度检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋军喜		91	515	13.0	18.0