单纯疱疹病毒Ⅰ型新开放读码框UL57的鉴定

• 作者: 佘明敏 蒋海芳 陈晓湘
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹 单纯疱疹病毒1型(HSV-1) UL57 开放读码框 基因转录 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 51-57
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9|R511
• 语种: 中文
• DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003496

摘要

单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)潜伏感染期间LATs的活跃转录可能与其启动子与增强子两侧的CTCF结合序列有关.本研究对位于UL56下游与LAT启动子上游之间并与CTCF结合序列重叠存在的一个新开放读码框(本研究中命名为UL57)进行了鉴定.首先利用HSV-1(F)细菌人工染色体(HSV-BAC)系统构建重组病毒HSV-EGFP-UL57,将EGFP序列插入UL57 5’端;然后分别通过Northern Blot和Western Blot检测EGFP标记的UL57的转录和表达;同时构建敲除UL57的重组病毒HSV-AUL57,观察UL57对病毒增殖的影响.结果显示,重组病毒HSV-EGFP-UL57感染HEp-2细胞17h后,EGFP探针检测到两条转录产物,其中1.8kb转录产物与预测大小相符;使用放线菌酮(Cycloheximide,CHX)阻断病毒即刻早期蛋白/早期蛋白合成后,UL57转录受到明显抑制.重组病毒HSV-EGFP-UL57感染Vero细胞后,9h可见融合蛋白表达,24h表达明显;融合蛋白分子量与预测大小(58kD)一致.病毒生长曲线显示,重组病毒HSV-EGFP-UL57及HSV-△UL57在Vero细胞中的增殖水平与HSV-1(F)基本一致.本研究表明,在HSV-1基因组(GenBank:GU734771.1) UL56下游与LAT启动子上游之间存在一个新开放读码框UL57(116 921bp～117 799bp),UL57可以进行转录,且其转录受病毒即刻早期蛋白/早期蛋白调控;转录产物可以翻译出融合蛋白,但表达水平较低.删除UL57对病毒增殖无明显影响.