3种口腔颌面部来源的间充质干细胞成血管内皮分化潜能的比较研究

• 作者: 方滕姣子 李晓霞 李静芝 汪晓彤 王媛媛 翟越 葛立宏 谢静 赵玉鸣 饶南荃
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 脱落乳牙牙髓干细胞 牙髓干细胞 颌骨骨髓间充质干细胞 血管内皮细胞分化 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 900-906
• 页数: 7页
• 分类号: R78
• 语种: 中文
• DOI: 10.19723/j.issn.1671-167X.2019.05.018

摘要

目的:研究来自口腔颌面部的脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)、牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)和颌骨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)的增殖能力及成血管内皮细胞分化潜能,为血管组织工程再生种子细胞的选择提供依据.方法:取临床乳牙和恒牙牙髓组织及颌骨组织并采用酶消化法分离培养相应的间充质干细胞,流式细胞技术检测间充质干细胞相关表面抗原的表达.采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞的增殖能力.通过Matrigel三维培养技术诱导间充质干细胞成血管内皮细胞分化,并通过管腔计数及real-time PCR技术比较3种间充质干细胞的成血管内皮细胞分化能力.采用鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)技术观察3种不同间充质干细胞新生血管能力.结果:3种干细胞均阳性表达CD73、CD90、CD105、CD146,阴性表达CD34、CD45,符合间充质干细胞表面标记物的表达规律.SHED和DPSC的CD146表达率多于BMSC,CCK-8法检测显示SHED的增殖能力最强.诱导后的3种细胞均可在Matrigel基质胶上形成管腔样结构,诱导后SHED和BMSC形成的血管总长度大于DPSC,SHED形成的管腔数多于BMSC和DPSC.real-time PCR结果显示几种成血管相关的细胞因子在不同细胞间表达存在差别.诱导后SHED的CD31、VEGFR2、vWF表达显著高于另外两种细胞.BMSC的VEGFR1表达量高于其他组,SHED高于DPSC.VEGF的表达在4组之间差异无统计学意义.3种细胞在CAM上计数新生血管数目显示较空白对照组差异无统计学意义,SHED组血管总长度较空白对照和BMSC大.结论:SHED、DPSC及BMSC均能向成血管内皮细胞方向诱导分化且在Matrigel培养基上形成血管和管腔,SHED具有更强的分化和形成管腔的能力,同时SHED较BMSC及DPSC具有更强的增殖能力.