黑豆胰蛋白酶抑制剂性质分析及高温对其消化特性的影响

• 作者: 刘光明 孙乐常 张凌晶 曹敏杰 苏子健 颜龙杰
• 来源期刊: 大豆科学
• 关键词: 纯化 黑豆 胰蛋白酶抑制剂 抑制 消化
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 分析加工
• 页码范围: 597-606
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2019.04.0597

摘要

胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)在食品科学和生物技术中具有重要的研究价值.为探讨黑豆胰蛋白酶抑制剂(black soybean trypsin inhibitor,BSTI)的性质及胃肠液消化特性,本研究通过脱脂、热处理、硫酸铵盐析以及阴离子柱层析等方法,从黑豆中纯化得到BSTI.SDS-PAGE显示BSTI呈单一条带,相对分子质量约为21 kDa.在60℃以下与pH2～11的范围内,BSTI呈现较高稳定性.当BSTI与胰蛋白酶的摩尔比达到1时,胰蛋白酶的活力被抑制在15％以下.抑制动力学结果表明,BSTI对胰蛋白酶的抑制属非竞争性抑制,其抑制常数Ki=0.24 nmol· L-.圆二色谱分析发现,在常温下BSTI的二级结构为:β-折叠43.4％,无规则卷曲29.0％,β-转角21.2％,α-螺旋8.1％.BSTI的变性温度为61±0.9℃.BSTI在模拟胃肠液消化过程中表现出很强的抗酶解作用,但经121℃热处理30 min后,其抗酶解作用显著降低,易被胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等主要消化酶消化.