体内转染黄芪来源miR-396可抑制哮喘小鼠Th2细胞的GATA-3表达

• 作者: 沈朝斌 王嵩 郁兰 陆磊 顾燕妮
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 体内转染 黄芪 微小RNA-396 哮喘 动物模型
• 年，卷（期）: 2019,（24）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 3001-3007
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5
• 字数: 5317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.24.011

摘要

目的:微小RNA(miRNAs)是一类对基因转录后调节起关键作用的小的非编码RNA.黄芪主要用于调节免疫功能.本次研究采用合成黄芪来源的miR-396拟似物(mimic)体内转染后对哮喘小鼠Th2细胞的抑制作用.方法:选择健康雄性BALB/c小鼠40只,分对照组、哮喘模型组、转染组、地塞米松治疗组,每组10只.用OVA诱导和激发小鼠制作哮喘模型.在完成第2次OVA激发后,转染组每只小鼠隔天经鼻滴入miR-396拟似物200 ng,共7次.治疗对照组给予腹腔注射地塞米松.实验后第58天处死小鼠,转染组采用RT-PCR检测肺组织、外周血和脾脏miR-396表达;同时测定各组脾脏匀浆单个核细胞中的T-bet、STAT-6、GATA-3、ROR-γt和Foxp3;采用ELISA测定各组肺匀浆中IL-5、IL-13、IL-17A、TGF-β和IFN-γ水平;光镜下观察肺组织病理学改变.结果:转染组小鼠肺组织miR-396为内参基因U6表达量的(10.69±1.27)倍;脾脏表达量为的(13.87±2.05)倍;外周血的表达量为(12.62±1.65)倍.miR-396转染组与哮喘模型组肺部细胞因子比较,IFN-γ水平显著提高(P<0.05);miR-396转染组IL-5、IL-13水平均显著低于哮喘模型组(P值均<0.001);且抑制作用优于地塞米松治疗组(P分别为0.001和0.004);转染组IL-17A水平被显著抑制(P<0.001),TGF-β水平得到显著提高(P<0.001),但其调节作用显著低于地塞米松治疗组.miR-396转染后显著降低了哮喘Th2细胞GATA-3 mRNA表达水平和Th17细胞ROR-γt mRNA的表达,但对抑制Th17细胞ROR-γt mRNA表达作用弱于地塞米松治疗组;miR-396转染对T-bet、STAT-6和Foxp-3 mRNA表达均无显著作用(P>0.05).miR-396转染组肺部病理改变提示炎症状况得到缓解.结论:本研究结果证实了经鼻滴入转染方法可使哮喘小鼠脾脏、外周血和肺组织均高表达植物来源的miR-396.研究表明,转染miR-396拟似物可抑制Th2细胞炎症因子IL-5和IL-13,显著降低Th2细胞的主要转录因子GATA-3.黄芪来源的miR-396可作为一种哮喘治疗策略加以深入研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王嵩		88	558	12.0	18.0
2	沈朝斌		7	35	3.0	5.0
3	郁兰		3	12	1.0	3.0
4	顾燕妮		4	5	2.0	2.0
5	陆磊		2	1	1.0	1.0