海藻糖合酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达

• 作者: 刘洪玲 杨少杰 王希晖 王瑞明 王腾飞 隋松森
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 海藻糖合酶 启动子 自诱导 发酵优化
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 29-36
• 页数: 8页
• 字数: 5048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019246

摘要

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为表达平台,海藻糖合酶为表达蛋白,研究了单启动子和多个启动子串联对外源蛋白表达的影响.分别选择6个启动子构建PsrfA、P43单启动子和PabrB-spoVG-LytR-mmgA四个时期特异性启动子串联表达系统进行验证.根据实验结果分析,组成型启动子P43转录强度最高,摇瓶中酶活达到3 381 U/g,串联启动子PabrB-spoVG-LytR-mmgA强度次之.针对验证酶活最高的重组菌pHT01-P43-treS进行发酵优化,并在5L发酵罐中进行放大实验,酶活达到7 215 U/g.实现了海藻糖合酶在枯草芽孢杆菌中自诱导高效表达,为获得高效率制备海藻糖合成酶的表达系统奠定了基础.