耐热α-半乳糖苷酶的高效表达及酶学性质初探

• 作者: 周波 杨江科 蒋晓芳
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 半乳糖苷酶 耐高温 多拷贝 高效表达 水解活性
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 116-121,115
• 页数: 7页
• 分类号: Q814.4
• 语种: 中文

摘要

[目的]实现耐热α-半乳糖苷酶在毕赤酵母中的高效表达, 并初步研究其酶学性质.[方法]克隆来源于埃默森篮状菌(Talaromyces emersonii) 的α-半乳糖苷酶基因TEgal, 构建p AO815-TEgal重组表达载体, 采用DNS法测定其水解活性及酶学性质;通过薄层层析研究其水解底物谱;并构建TEgal基因多拷贝表达框, 实现了该基因的高效表达.[结果]TEgal对棉籽糖水解活性最高9. 5 U/m L, 最适温度75℃, 最适pH值3. 5; Na+、K+对TEgal有促进作用, Mg2+、Co2+、Mn2+、Ca2+、Fe2+、Zn2+均能抑制酶活, 多拷贝重组表达菌株活性最高为22. 4 U/m L.[结论]成功构建耐热α-半乳糖苷酶高效表达菌株, 通过提升基因剂量将酶活和蛋白含量提高了135％和356％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨江科		19	40	4.0	5.0
2	蒋晓芳		1	0	0.0	0.0
3	周波		2	0	0.0	0.0