核盘菌转录因子SsMCM1原核表达与亚细胞定位

• 作者: 刘言志 刘金亮 吕兴明 张祥辉 张艳华 张鑫生 潘洪玉 王雪亮
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 核盘菌 转录因子 SsMCM1 原核表达 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 35-42
• 页数: 8页
• 分类号: S432.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000367

摘要

核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.) de Bary]是一类寄主范围广泛的植物病原真菌.MADS-box蛋白家族基因广泛存在于生物体中,参与调控细胞识别、新陈代谢、细胞周期等.核盘菌转录因子SsMCM1调控其子实体形成与致病性.为进一步揭示SsMCM1的作用机制,本研究以核盘菌野生型菌株uf-70的cDNA为模板,扩增得到SsMCM1基因,并与原核表达载体pET-28a(+)连接,构建成重组质粒转化到大肠杆菌BL21(pLysS)表达菌株中,通过IPTG的诱导和亲和层析,纯化得到SsMCM1蛋白,并以此为抗原获得抗血清,完成效价测定.利用特异性抗血清,与核盘菌不同组织蛋白进行特异性的免疫结合,发现其与核盘菌总蛋白、核盘菌细胞质总蛋白均特异性结合,而核盘菌细胞壁蛋白未发现特异性反应,表明SsMCM1不定位于核盘菌细胞壁上.此外,构建其亚细胞定位载体pCG-1301∷SsMCM1,并将重组质粒转化到农杆菌中,通过农杆菌的侵染作用进行瞬时表达,发现SsMCM1定位于细胞核中,作为转录因子调控核盘菌的子实体发育与致病性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张祥辉		8	48	3.0	6.0
2	刘金亮		33	205	8.0	13.0
3	潘洪玉		55	329	9.0	16.0
4	张艳华		29	189	9.0	12.0
5	张鑫生		19	37	4.0	6.0
6	王雪亮		3	4	1.0	2.0
7	刘言志		3	0	0.0	0.0
8	吕兴明		1	0	0.0	0.0