CRISPR/Cas9介导下高效敲除SQSTM1/p62基因的Hela细胞模型的建立

• 作者: 姚建凤 彭维林 李明 杨晓煜 林建生 连建烽 郑鸣 黄荣富
• 来源期刊: 解剖学杂志
• 关键词: CRISPR/Cas9基因编辑 p62基因 过氧化氢 细胞凋亡 Hela细胞
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 字数: 3516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2019.01.001

摘要

目的:探讨针对p62双sgRNA向导CRISPR/Cas9基因编辑效率.方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功敲除p62基因,通过细胞有限稀释法和嘌呤霉素筛选,免疫印迹法验证双sgRNA和单sgRNA向导的基因编辑成功率;流式细胞仪验证p62缺失对Hela细胞凋亡的影响.结果:免疫印迹分析得出双sgRNA导向的p62敲除效率高于单sgRNA导向的敲除,靶序列测序比对分析确认p62编码基因发生大片段缺失突变.H2O2处理稳定敲除的Hela细胞系显示,p62基因敲除能明显抑制Hela细胞H2O2诱导的早期细胞凋亡.结论:成功建立了p62敲除的Hela细胞系,双sgRNA向导的CRISPR/Cas9基因编辑体系可能是一种更有效的编辑工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄荣富		14	58	5.0	7.0
2	李明		7	5	2.0	2.0
3	姚建凤		5	2	1.0	1.0
4	彭维林		1	0	0.0	0.0
5	林建生		1	0	0.0	0.0
6	连建烽		1	0	0.0	0.0
7	杨晓煜		1	0	0.0	0.0
8	郑鸣		1	0	0.0	0.0