人乳头瘤病毒52型病毒样颗粒制备及其生物活性

• 作者: 刘伟 吴丛梅 孙博 殷玉和 董雪 郭晶
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乳头瘤病毒52型 L1蛋白 可溶性表达 类病毒颗粒
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 127-132,139
• 页数: 7页
• 分类号: Q331
• 语种: 中文

摘要

[目的]利用大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白, 并获得HPV52病毒样颗粒(VLPs) .[方法]优化并合成HPV52L1基因, 构建p ET-30a-52L1表达载体粒, 转化大肠杆菌E. coli BL21 StarTM(DE3) .经IPTG诱导表达, 阳离子交换层析纯化, SDS-PAGE和Western Blotting鉴定, BALB/c小鼠免疫2次, 初次后4w检测免疫血清中HPV52中和抗体滴度.[结果]获得纯度90％的HPV52L1蛋白, 将获得的HPV52L1蛋白进行解组装和重组装形成VLPs, 动态光散射观察到粒径约为70nm, 透射电镜观察到50～60nm的均一VLPs, 中和抗体滴度达25600.[结论]大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白, 并经过一步柱层析纯化获得纯度达90％的L1蛋白, 经解组装重组装获得粒径大小为50～60nm的VLPs, 具有良好免疫原性.