梨灰霉病菌拮抗细菌Pseudomonas extremorientalis的鉴定、发酵条件优化及防效评价

• 作者: 侯普兴 刘倩如 张作刚 张曦倩 王建明 王春伟 王燕 王琳 王美琴 董田
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 梨 灰葡萄孢 Pseudomonas extremorientalis 鉴定 发酵条件 防效
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 437-448
• 页数: 12页
• 分类号: S476
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2019.03.007

摘要

灰霉病是梨贮藏期的主要病害,发病率高,为害严重.为了有效控制该病害发生,利用平皿稀释法从梨根际土壤中分离内生细菌,并采用琼脂平板扩散法进行抑菌活性初筛,筛选出1株拮抗细菌L21,基于形态特征、生理生化特性及16S rRNA和gyrB序列分析,鉴定为Pseudomonas extremorientalis.采用生长速率法测定菌株L21的无菌发酵液对12种病原真菌均有抑制作用,采用Salkowski比色法测定菌株L21能够分泌吲哚-3-乙酸(IAA),采用酪蛋白培养基平板检测菌株L21可以产生胞外蛋白酶.在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman试验设计筛选出pH、硫酸锰和转速3个影响发酵的重要因素,利用最陡爬坡试验和Box-Behnken试验设计,获得菌株L21的最佳发酵条件为蔗糖20 g/L、牛肉膏20 g/L、硫酸锰3.00 g/L、甘油1 g/L、K2HPO4 1.50 g/L、接种量8％、温度34℃、pH 7.31、转速200.66 r/min和培养时间15 h.处理96 h后,菌株L21对梨灰霉病的防效为74.23％,与多菌灵的防效差异不显著.本研究表明菌株L21具有广谱抑菌活性,为植物真菌病害的生物防治提供新的生防资源.