摘要:
目的:探究P2X4受体在阿片类药物诱导的痛觉过敏中的作用.方法:成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为尾静脉泵注生理盐水组(N0组)、瑞芬太尼0.5μg/(kg·min)组(R1组)、瑞芬太尼1.0 μg/(kg·min)组(R2组)、瑞芬太尼1.5 μg/(kg·min)组(R3组)、瑞芬太尼5.0μg/(kg.min)组(R4组).于处理前1 d(T1),尾静脉置管后30 min(T2),停药后30 min(T3),1 h(T4),2 h(T5),24 h(T6)测量大鼠机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL),获得诱导痛觉过敏最佳的瑞芬太尼输注速度;随后取成年雄性SD大鼠,分为尾静脉置管后泵入生理盐水组(N组)、尾静脉置管后泵入瑞芬太尼1.0 μg/(kg·min)组(R组).于上述处理时间点T1,T2,T4测量大鼠PWMT和PWTL,并于停药后1h选取大鼠脊髓腰膨大检测P2X4受体的mRNA和蛋白表达.另取成年雄性SD大鼠,并将其分为切口痛模型并尾静脉置管后泵入生理盐水组(I+N组)和切口痛模型并尾静脉置管后泵入瑞芬太尼L0 μg/(kg·min)组(I+R组).于上述处理时间点T1,T2,T3,T4,T5,T6以及8 h(T7)和72 h(T8)测量大鼠PWMT和PWTL,于停药后1h取大鼠脊髓腰膨大组织检测P2X4受体的mRNA和蛋白表达,免疫荧光检测小胶质细胞激活的状态.结果:T3和T5时间点PWMT和PWTL的趋势均为R4组<R3组<R2组<R1组,差异均有统计学意义(均P<0.05);T4时间点R2,R3,R4组的PWMT和PWTL趋势为R4组<R2组、R4组<R3组,差异均有统计学意义(均P<0.05);R2,R3,R4组在T4时间点的PWMT和PWTL低于其他时间点,差异均有统计学意义(均P<0.05).与N组相比,R组大鼠T4时间点的PWMT和PWTL均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);但R组与N组两组大鼠脊髓腰膨大的P2X4受体蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(均P>0.05).与I+N组相比,I+R组大鼠在T4,T5,T6时间点的PWMT和PWTL明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),同时I+R组大鼠脊髓P2X4受体mRNA和蛋白表达水平均明显上调,差异均有统计学意义(均P<0.05).此外,I+R组大鼠脊髓背角的小胶质细胞的活化较I+N组明显增强.结论:静脉注射瑞芬太尼可致大鼠痛觉过敏,单纯静脉注射瑞芬太尼导致的痛觉过敏可能与P2X4受体无关;瑞芬太尼可导致切口痛大鼠出现更明显的痛觉过敏,其中小胶质细胞活化及P2X4受体可能参与瑞芬太尼诱发术后痛觉过敏的形成机制.